Mat

BioximiaForYou

Alfa-amylase (diastase, alfa-1,4-glukan-4-glukanohydrolase) tilhører klassen av hydrolaser som katalyserer hydrolysen av polysakkarider, inkludert stivelse og glykogen, til dextriner og enkle di- og monosakkarider (maltose, glukose).

Amylase i de høyeste konsentrasjonene er funnet i henholdsvis bukspyttkjertelen og spyttkjertlene - i form av bukspyttkjertel og spyttisoenzymer. Under fysiologiske forhold består serumamylase av 40% av bukspyttkjertelamylase og 60% av spyttamylase. Ved bruk av spesifikke inhibitorer eller elektroforese-separasjon kan opprinnelsen til enzymet som er tilstede i plasma bestemmes. Amylase fjernes fra plasma i nyrene og skilles ut i urinen. Dette gjør det mer informativt for å bestemme aktiviteten til alfa-amylase i urinen som en test for å vurdere den funksjonelle tilstanden i bukspyttkjertelen. Økningen i amylaseaktivitet er av største betydning i diagnosen bukspyttkjertelsykdommer.

Aktiviteten til alfa-amylase i blod og urin endres betydelig i løpet av dagen.

Hyperamilasemia - økt serumamylaseaktivitet.

Ø Akutt pankreatitt - maksimumsverdiene oppstår de første 6 - 12 timene etter symptomdebut. Etter denne tiden avtar aktiviteten til enzymet, normaliserer seg etter 2-5 dager. Hvis aktiviteten vedvarer økt i mer enn 5 dager, indikerer dette en økning i betennelse..

Ø Forverring ved kronisk pankreatitt

Ø Perforering av duodenalsår

Ø Tarmobstruksjon

Ø Akutt blindtarmbetennelse

Ø Alkaloider (morfin, heroin, kodein)

Ø Metanolforgiftning

Ø Store doser etanol (hos alkoholikere)

Hypoamylasemia - en reduksjon i serumamylaseaktivitet (har praktisk talt ingen diagnostisk verdi).

Ø Bukspyttkjertelenekrose

Ø hjerteinfarkt

Hyperamylazuria - økt utskillelse av amylase i urinen.

Ø Akutt pankreatitt - en økning i enzymaktivitet observeres i løpet av de første 24 timene av betennelse. Økt utskillelse av enzymet i urinen vedvarer de neste 7-10 dagene, til tross for at amylaseaktiviteten i blodet er normal etter 3-4 dager.

Ø Bukspyttkjertelkreft

Ø Perforering av duodenalsår

Ø Cholelithiasis

Ø Sykdommer i spyttkjertlene, parotitt, steiner i spyttkanalene

Hypoamylazuria - en reduksjon i utskillelsen av amylase i urinen.

Ø Nyresykdom

Ø Leversykdommer

"Bestemmelse av aktiviteten til alfa-amylase i biologiske væsker ved hjelp av den enhetlige Karavey-metoden"

Prinsipp: Under virkning av alfa-amylase hydrolyseres stivelse for å danne produkter som ikke gir en farreaksjon med jod. Intensiteten av reduksjonen i fargen på jodstivelseskomplekset per tidsenhet er proporsjonal med aktiviteten til enzymet.

Testmateriale: friskt blodserum, urin.

Reagens nr. 1 - buffer

Reagens nr. 2 - konsentrert substrat

Reagens nr. 3 - konsentrert jodoppløsning

Reagens nr. 4 - kaliumfluoridoppløsning

Reagens nr. 5 - saltsyre

Klargjøring av reagenser for analyseprosedyren:

Arbeidsoppløsning av substratet: bland reagenser nr. 1 og nr. 2 i et forhold på 24: 1.

Arbeidsoppløsning av jod: bland destillert vann, reagens nr. 3 og reagens nr. 4 i forholdet 7: 1: 2.

Arbeidsoppløsning av saltsyre: fortynn innholdet i flaske nr. 5 med destillert vann 16 ganger.

Amylase

α - Amylase (diastase, 1,4 - a - D - glukanhydrolase, EC 3.2.1.1.) katalyserer hydrolysen av α - 1,4 - glukosidbindinger av stivelse, glykogen og beslektede polysakkarider til maltose, dekstriner og andre polymerer. Molekylvekten til enzymet er omtrent 48000 D. Molekylet inneholder et kalsiumatom, som ikke bare aktiverer enzymet, men også beskytter det mot virkningen av proteinaser, aktiviteten til amylase øker når den utsettes for klorioner. I blodet er det representert av to isoenzymer: bukspyttkjertel - P-type og spytt - S-type, som hver er delt inn i flere fraksjoner. S-typen isozym utgjør 45-70% som helhet (57% i gjennomsnitt), resten er P-typen. Begge isoenzymer har nesten identiske katalytiske og immunologiske egenskaper, er litt forskjellige i elektroforetisk mobilitet, men er godt skilt ved gelfiltrering på DEAE Sephadex. Det er også makroamylase, som ikke utskilles av nyrene, men kan finnes i serum hos normalt (ca. 1% av friske mennesker) og patologi (2,5%).

Høy amylaseaktivitet er observert i parotid og bukspyttkjertel. Samtidig finnes aktiviteten, selv om den er mye lavere, i tykktarmen, skjelettmuskulaturen, leveren, nyrene, lungene, egglederne og fettvevet. I blodet er enzymet assosiert med både blodplasma-proteiner og dannede elementer. Enzymaktiviteten er den samme hos menn og kvinner, og avhenger ikke av naturen til maten og tidspunktet på dagen.

De eksisterende metodene for å studere aktiviteten til a-amylase i biologiske væsker er delt inn i to store grupper:

1. Sukkerholdig (reduktometrisk), basert på studien av sukker dannet av stivelse ved den reduserende effekten av glukose og maltose.

2. Amyloklast, basert på bestemmelsen av resten av ufordøyd stivelse:

  • i henhold til intensiteten av reaksjonen med jod. Disse metodene er mer følsomme og spesifikke, men nøyaktigheten deres avhenger i stor grad av kvaliteten på stivelsen og optimaliseringen av bestemmelsesforholdene..
  • når det gjelder stivelsessuspensjonens viskositet, er de ikke veldig nøyaktige og brukes for øyeblikket ikke.

3. Metoder som bruker kromogene substrater - er basert på bruk av substrat-fargestoffkomplekser, som spaltes under påvirkning av α-amylase for å danne et vannløselig fargestoff..

4. Metoder basert på koblede enzymatiske reaksjoner:

Stivelse + H2Om maltose + maltotriose + dextrin

Maltose + H2О 2 Glukose

Glukose + ATP Glukose - 6 - F + ATP

Glukose - 6 - F + NADP glukonat - 6 - F + NADPH

Enzymaktiviteten bestemmes av akkumuleringsgraden av NADPH.

To amyloklastiske metoder er godkjent som enhetlige metoder: Karaveya (med et vedvarende stivelsessubstrat) og Smith-Roe.

Bestemmelse av amylaseaktivitet med farget
substrat satt av "Lachema"

Prinsipp

α-Amylase katalyserer hydrolysen av et uoppløselig farget stivelsessubstrat for å danne et blått, vannløselig fargestoff. Mengden frigitt fargestoff er proporsjonal med enzymets katalytiske aktivitet.

Normale verdier

Serumspesifisert metode2,3-5,8 μkat / l
på Karavey12‑32 mg / s · l
av Smith-Roe4,4-8,3 mg / s · l
Hos nyfødte er aktivitetsverdiene 2-5 ganger lavere.
Urinspesifisert metode16,6-33,3 μkat / l
av Caraway eller Smith-RoyOvervurdering av resultatene er observert under stressende forhold, med sammentrekning av lukkemuskelen til Oddi under påvirkning av for eksempel narkotiske smertestillende midler, reduserte resultater oppnås ved bruk av oksalat og sitrat.

Klinisk og diagnostisk verdi

En økning i enzymaktivitet forekommer hovedsakelig i sykdommer i bukspyttkjertelen. Ved akutt pankreatitt øker aktiviteten i blod og urin 10-30 ganger. Hyperamilasemia oppstår ved sykdomsutbruddet, når maksimalt 12-24 timer, og avtar deretter og går tilbake til normalt på dag 2-6. Imidlertid, med total pankreasnekrose, kan en økning i amylaseaktivitet ikke bli notert. En økning i enzymaktivitet oppdages under graviditet, nyresvikt, tarmobstruksjon, sykdommer i galleveiene, diabetisk ketoacidose, noen svulster i lungene og eggstokkene, skade på spyttkjertlene. Deteksjon av økt mengde isoenzymer av P- eller S-typen er ikke patognomonisk for noen sykdom.

Lave serumenzymnivåer er ikke signifikante.

Amylase

(synonymt med diastase - foreldet)

enzymer som katalyserer hydrolytisk nedbrytning av stivelse, glykogen og produkter av deres ufullstendige nedbrytning (dekstriner og oligosakkarider). De er de viktigste enzymene i karbohydratkatabolisme (se. Karbohydratmetabolisme). På grunn av virkningen på polysakkarider, skilles α-, β- og γ-amylaser: under påvirkning av α-amylaser hydrolyseres polysakkarider til oligosakkarider, β-amylaser spalter disakkaridmaltosen fra de ytre kjedene til polysakkaridmolekylet, γ-amylase - glukose. Bestemmelse av α-amylaseaktivitet i blodserum og urin brukes til diagnostisering av en rekke sykdommer som en ekstra diagnostisk test.

Den mest informative og pålitelige er en økning i aktiviteten til A. i blodet i sykdommer i bukspyttkjertelen, som oppstår på grunn av en økning i aktiviteten til bukspyttkjertelen isoenzym α-amylase. Aktiviteten til A. i blodet og urinen øker kraftig ved akutt pankreatitt (de første tre dagene fra sykdomsutbruddet kan enzymets aktivitet øke med 90% eller mer) og i kreft i bukspyttkjertelen. En økning i A.-aktivitet i blodet er også kjent i viral hepatitt, skade på spyttkjertlene, nyresvikt, behandling med kortikosteroider, salicylater, tetracyklin-antibiotika, furosemid, histamin.

Aktiviteten til α-amylase i biologiske væsker bestemmes av mengden løselig stivelse hydrolysert av den (amyloklastisk metode). To amyloklastiske metoder er godkjent som enhetlig i Sovjetunionen: Karavey-metoden og Smith-Row-metoden. Karavey-metoden er basert på det faktum at α-amylase bryter ned stivelse til produkter som ikke gir en farreaksjon med jod; reduksjonen i fargeintensitet brukes til å bedømme enzymets aktivitet. De normale verdiene av α-amylaseaktivitet, bestemt ved Karavey-metoden, er: i blodserum 3,3-8,9 mg / (s l), eller 12-32 mg / (h․ml), i urin opp til 44 mg / ( s․l), eller opptil 120 mg / (h․ml), i duodenalt innhold 1,7-4,4 g / (s․l), eller 6-16 g / (h․ml).

Den amyloklastiske metoden for å bestemme aktiviteten til α-amylase i henhold til Smith - Rowe er basert på fotometrisk måling av reduksjonen i konsentrasjonen av løselig stivelse som et resultat av hydrolyse av amylase. Normale verdier av α-amylaseaktivitet, bestemt ved Smith-Rowe-metoden, er 16-30 mg i blodet, og opptil 160 mg stivelse hydrolysert av amylase inneholdt i 1 ml blod eller urin i løpet av 1 times inkubasjon ved 37 °. Se også karbohydrater, enzymer.

Biokjemisk blodprøve, blodenzymer. Amylase, lipase, ALT, AST, laktatdehydrogenase, alkalisk fosfatase - øke, redusere ytelsen. Årsaker til brudd, analysetolkning.

I en biokjemisk blodprøve brukes ofte bestemmelse av enzymaktivitet. Hva er enzymer? Et enzym er et proteinmolekyl som akselererer biokjemiske reaksjoner i menneskekroppen. Et synonym for enzym er begrepet enzym. Foreløpig brukes begge disse begrepene i samme betydning som synonymer. Imidlertid kalles vitenskapen som studerer enzymers egenskaper, struktur og funksjon enzymologi..

Tenk på hva denne komplekse strukturen er - et enzym. Enzymet består av to deler - selve proteinet og det aktive sentrum av enzymet. Proteindelen kalles apoenzym, og det aktive senteret kalles koenzym. Hele enzymmolekylet, det vil si apoenzym pluss koenzym, kalles holoenzym. Apoenzymet er alltid representert utelukkende av et protein med tertiær struktur. Tertiær struktur betyr at en lineær kjede av aminosyrer blir transformert til en struktur med kompleks romlig konfigurasjon. Koenzym kan representeres av organiske stoffer (vitamin B6, B1, B12, flavin, heme, etc.) eller uorganiske (metallioner - Cu, Co, Zn, etc.). Faktisk utføres akselerasjonen av den biokjemiske reaksjonen nøyaktig av koenzymet.

Hva er et enzym? Hvordan enzymer fungerer?

Stoffet som enzymet virker på kalles substrat, og stoffet som er resultatet av reaksjonen kalles produktet. Ofte dannes enzymnavn ved å legge til slutten - aza til navnet på substratet. For eksempel suksinatdehydrogenase - bryter ned suksinat (ravsyre), laktatdehydrogenase - bryter ned laktat (melkesyre) osv. Enzymer er delt inn i flere typer avhengig av hvilken type reaksjon de akselererer. For eksempel utfører dehydrogenaser oksidasjon eller reduksjon, hydrolaser utfører spalting av en kjemisk binding (trypsin, pepsin - fordøyelsesenzymer), etc..

Hvert enzym akselererer bare en spesifikk reaksjon og fungerer under visse forhold (temperatur, surhet i miljøet). Enzymet har en affinitet for substratet, det vil si at det bare kan fungere med dette stoffet. Anerkjennelse av "ens" substrat er gitt av apoenzymet. Det vil si at prosessen med enzymarbeidet kan fremstilles som følger: apoenzymet gjenkjenner substratet, og koenzymet akselererer reaksjonen til det anerkjente stoffet. Dette prinsippet for interaksjon ble kalt ligand-reseptor eller interaksjon i henhold til nøkkel-lås-prinsippet, det vil si, akkurat som en individuell nøkkel passer til en lås, slik at et individuelt substrat passer til et enzym.

Amylase blod

Amylase produseres av bukspyttkjertelen og er involvert i nedbryting av stivelse og glykogen til glukose. Amylase er et av enzymene som er involvert i fordøyelsen. Det høyeste amylaseinnholdet finnes i bukspyttkjertelen og spyttkjertlene..

Det er flere typer amylase - α-amylase, β-amylase, γ-amylase, hvorav den mest utbredte bestemmelsen av aktiviteten til α-amylase. Det er konsentrasjonen av denne typen amylase som bestemmes i blodet i laboratoriet..

Menneskelig blod inneholder to typer α-amylase - P-type og S-type. I urinen er 65% av P-typen av α-amylase tilstede, og i blodet er opptil 60% S-typen. P-type α-amylase av urin i biokjemiske studier kalles diastase, for å unngå forvirring.

Α-amylaseaktiviteten i urinen er 10 ganger høyere enn α-amylaseaktiviteten i blodet. Bestemmelse av aktiviteten til α-amylase og diastase brukes til å diagnostisere pankreatitt og noen andre sykdommer i bukspyttkjertelen. Ved kronisk og subakutt pankreatitt brukes bestemmelsen av aktiviteten til α-amylase i juice av tolvfingertarmen.

Blodamylasehastighet

analysenavnnorm i μcatal / lmåleenheter i U / L (U / L)
  • blodamylaseaktivitet
16-30 μcatal / l20-100 U / l
  • urin diastase (amylase) aktivitet
28-100 μcatal / lopptil 1000 U / l

Økt blodamylase

En økning i aktiviteten til α-amylase i blodet kalles hyperamylasemia, og en økning i aktiviteten til urin diastase kalles hyperamylazuria..

En økning i blodamylase oppdages under følgende forhold:

  • ved begynnelsen av akutt pankreatitt, oppnås maksimum etter 4 timer fra angrepens begynnelse, og avtar til normalt i 2-6 dager fra angrepets begynnelse (en økning i aktiviteten til α-amylase er mulig 8 ganger)
  • med forverring av kronisk pankreatitt (mens aktiviteten til α-amylase øker 3-5 ganger)
  • hvis det er svulster eller steiner i bukspyttkjertelen
  • akutt virusinfeksjon - kusma
  • alkoholforgiftning
  • svangerskap utenfor livmoren
Når urinamylase er forhøyet?
En økning i konsentrasjonen av amylase i urinen utvikler seg i følgende tilfeller:
  • i akutt pankreatitt oppstår en økning i diastaseaktivitet 10-30 ganger
  • med en forverring av kronisk pankreatitt, øker diastaseaktiviteten 3-5 ganger
  • ved inflammatoriske leversykdommer er det en moderat økning i diastaseaktivitet 1,5-2 ganger
  • akutt blindtarmbetennelse
  • kolecystitt
  • tarmobstruksjon
  • alkoholforgiftning
  • blødning fra et sår i mage-tarmkanalen
  • i behandlingen av sulfa medisiner, morfin, diuretika og p-piller
Med utviklingen av total pankreasnekrose, kreft i bukspyttkjertelen og kronisk pankreatitt, kan det hende at aktiviteten til α-amylase ikke øker.

Redusert blod- og urinamylase

Det er forhold i kroppen der aktiviteten til α-amylase kan reduseres. Lav urin diastaseaktivitet påvises ved alvorlig arvelig sykdom - cystisk fibrose.

I blodet er en reduksjon i aktiviteten til α-amylase mulig etter et angrep av akutt pankreatitt, med pankreasnekrose og også med cystisk fibrose.

Til tross for at α-amylase er tilstede i nyrene, leveren og bukspyttkjertelen, blir bestemmelsen av aktiviteten hovedsakelig brukt til diagnostisering av sykdommer i bukspyttkjertelen..

Hvordan bli testet for amylase?

Lipase

Strukturen, typene og funksjonene til lipase
Lipase er et av fordøyelsesenzymer som er involvert i nedbrytningen av fett.Dette enzymet krever nærvær av gallsyrer og et koenzym som kalles colipase. Lipase produseres av forskjellige menneskelige organer - bukspyttkjertel, lunger, leukocytter.

Lipase, som er syntetisert i bukspyttkjertelen, har den største diagnostiske verdien. Derfor brukes bestemmelsen av lipaseaktivitet hovedsakelig til diagnostisering av sykdommer i bukspyttkjertelen..

Blodlipasehastighet

Lipase aktivitetsrate
  • blodlipaseaktivitet
13 - 60U / ml

Når blodlipase er forhøyet?

Når blodlipasenivået er lavt?

Hvordan forberede seg på en lipasetest?

For å bestemme lipaseaktiviteten, tas blod fra en blodåre om morgenen på tom mage. Kvelden før testen skal du ikke ta fet, krydret og krydret mat. I nødstilfeller doneres blod fra en blodåre uansett tid på dagen og forberedelse. For øyeblikket, for å bestemme aktiviteten til lipase, brukes ofte den immunkjemiske eller enzymatiske metoden. Den enzymatiske metoden er raskere og krever færre kvalifikasjoner.

Laktatdehydrogenase (LDH)

Hastigheten av laktatdehydrogenase (LDH) blod

LDH-priser i blodet
  • voksne
0,8-4 μmol / t * l140-350 U / l
  • nyfødte
2,0-8 μmol / t * l400-700 U / l

Diagnostisk verdi av LDH-isoformer

For diagnostisering av forskjellige sykdommer er bestemmelsen av aktiviteten til LDH-isoformer mer informativ. For eksempel med hjerteinfarkt er det en signifikant økning i LDH1. For laboratoriebekreftelse av hjerteinfarkt bestemmes LDH1 / LDH2-forholdet, og hvis dette forholdet er større enn 1, har personen hatt hjerteinfarkt. Imidlertid er slike tester ikke mye brukt på grunn av høye kostnader og kompleksitet. Vanligvis bestemmes den totale aktiviteten til LDH, som er summen av den totale aktiviteten til alle LDH-isoformene..

LDH i diagnosen hjerteinfarkt
La oss vurdere den diagnostiske verdien av å bestemme den totale aktiviteten til LDH. Bestemmelse av LDH-aktivitet brukes til sen diagnose av hjerteinfarkt, siden en økning i aktiviteten utvikler seg 12-24 timer etter angrepet og kan forbli på et høyt nivå i opptil 10-12 dager. Dette er en veldig viktig omstendighet når man undersøker pasienter innlagt på sykehus etter et angrep. Hvis økningen i LDH-aktivitet er ubetydelig, så har vi å gjøre med et lite fokalinfarkt, hvis tvert imot økningen i aktivitet er langsiktig, betyr det at vi snakker om et omfattende hjerteinfarkt. Hos pasienter med angina pectoris øker LDH-aktiviteten de første 2-3 dagene etter angrepet..

LDH i diagnosen hepatitt
Aktiviteten til total LDH kan øke i akutt hepatitt (på grunn av en økning i aktiviteten til LDH4 og LDH5). Samtidig øker serum LDH-aktiviteten i de første ukene av den isteriske perioden, det vil si de første 10 dagene.

LDH-norm hos friske mennesker:

En økning i LDH-aktivitet hos friske mennesker (fysiologisk) er mulig etter trening, under graviditet og etter å ha drukket alkohol. Koffein, insulin, aspirin, acebutolol, cefalosporiner, heparin, interferon, penicillin, sulfonamider forårsaker også en økning i LDH-aktivitet. Derfor, når man tar disse legemidlene, må man ta hensyn til muligheten for økt LDH-aktivitet, noe som ikke indikerer tilstedeværelsen av patologiske prosesser i kroppen..

Årsaker til økt LDH i blodet

Hvordan bli testet for LDH?

Alaninaminotransferase (ALT, ALT)

Alaninaminotransferase (ALT / ALT) blodnorm

ALT / ALT-norm
  • for menn
opptil 40U / L.
  • for kvinner
opptil 32U / L.


En økning i ALT-aktiviteten hos friske mennesker (fysiologisk) kan være forårsaket av inntak av visse medisiner (antibiotika, barbiturater, medisiner, antineoplastiske legemidler, p-piller, ikke-steroide antiinflammatoriske legemidler, dikumariner, echinacea, valerian), alvorlig fysisk anstrengelse, traumer. Det observeres også høy ALT-aktivitet hos ungdommer i perioden med intensiv vekst..

ALT i diagnosen leversykdommer
Ved diagnostisering av patologiske tilstander i kroppen er en økning i ALT-aktivitet et spesifikt symptom på akutt leversykdom. En økning i ALT-aktiviteten i blodet oppdages 1-4 uker før sykdomssymptomene begynner og 7-10 dager før det maksimale nivået av bilirubin i blodet vises. Økningen i ALT-aktivitet ved akutt leversykdom er 5-10 ganger. En økt ALT-aktivitet i lang tid eller økningen i de sene stadiene av sykdommen indikerer utbruddet av massiv levernekrose.

Årsaker til høy ALAT (ALAT)

Høy ALT-aktivitet i blodet påvises i nærvær av slike patologier:

  • akutt hepatitt
  • skrumplever
  • obstruktiv gulsott
  • administrering av hepatotoksiske legemidler (f.eks. antibiotika, blysaltforgiftning)
  • forfall av en stor svulst
  • leverkreft eller levermetastaser
  • brannsykdom
  • omfattende hjerteinfarkt
  • traumatisk skade på muskelvev
Pasienter med mononukleose, alkoholisme, steatose (hepatose) som har gjennomgått hjerteoperasjoner, kan også oppleve en liten økning i ALT-aktivitet..

Ved alvorlige leversykdommer (alvorlig skrumplever, levernekrose), når antall aktive leverceller synker, så vel som med mangel på vitamin B6, observeres en reduksjon i ALT-aktivitet i blodet.

Hvordan bli testet for ALT (ALT)?

Aspartataminotransferase (AST, AsAT)

Norm av aspartataminotransferase (AST / AsAT)

Høyere verdier av AST-aktivitet hos friske mennesker (fysiologisk) er mulig ved overdreven muskelanstrengelse, ved å ta visse medisiner, for eksempel echinacea, baldrian, alkohol, høye doser vitamin A, paracetamol, barbiturater, antibiotika, etc..

Norma AST / ASAT
  • for menn
15-31U / L.
  • for kvinner
20-40U / L.

Aktiviteten til AST i blodserumet øker 4-5 ganger under hjerteinfarkt og forblir det i 5 dager. Hvis aktiviteten til AST forblir på et høyt nivå og ikke avtar innen 5 dager etter angrepet, indikerer dette en ugunstig prognose for en pasient med hjerteinfarkt. Hvis det fortsatt er en økning i aktiviteten til enzymet i blodet, indikerer dette faktum en utvidelse av hjerteinfarkt-sonen.

Ved nekrose eller skade på leverceller øker også AST-aktiviteten. Dessuten, jo høyere enzymaktivitet, jo større grad av skade.

Hvorfor øker aspartataminotransferase (AST, AsAT)?

En økning i AST-aktivitet i blodet er til stede i følgende tilfeller:

  • hepatitt
  • levernekrose
  • skrumplever
  • alkoholisme
  • leverkreft og levermetastaser
  • hjerteinfarkt
  • arvelige og autoimmune sykdommer i muskelsystemet (Duchenne muskeldystrofi)
  • mononukleose
  • hepatose
  • kolestase
Det er en rekke andre patologiske tilstander der en økning i AST-aktivitet også forekommer. Disse forholdene inkluderer - forbrenning, traumer, heteslag, forgiftning med giftig sopp.

Lav AST-aktivitet observeres med mangel på vitamin B6 og tilstedeværelse av omfattende leverskader (nekrose, skrumplever).

Imidlertid bruker klinikken bestemmelse av AST-aktivitet hovedsakelig for diagnostisering av skade på hjerte og lever. Under andre patologiske forhold endres også enzymets aktivitet, men endringen er ikke spesifikk, og representerer derfor ikke en høy diagnostisk verdi.

De Ritis-koeffisient. Hvordan fortelle et hjerteinfarkt fra leverskade

For differensialdiagnose av lever- eller hjerteskade brukes de Ritis-koeffisienten. De Ritis-koeffisienten er forholdet mellom AST / ALT-aktivitet, som normalt er 1,3. En økning i de Ritis-koeffisienten over 1,3 er karakteristisk for hjerteinfarkt, og en reduksjon under 1,3 påvises ved leversykdommer..

Alkalisk fosfatase (ALP)

Blod alkalisk fosfatasehastighet

  • voksne
30-90U / L.
  • tenåringer
opp til 400U / L.
  • gravid
opptil 250U / L.
Aktiviteten av alkalisk fosfatase i blodet til friske mennesker (fysiologisk økning) øker med en overdose av vitamin C, mangel på kalsium og fosfor i kostholdet, tar p-piller, hormonelle preparater av østrogener og progesteroner, antibiotika, sulfonamider, magnesia, omeprazol, ranitidin, etc..

Alkalisk fosfatase i diagnosen sykdommer i lever og galleveier
Bestemmelse av ALP-aktivitet ved mistanke om leversykdom har høy spesifisitet og diagnostisk verdi. Med obstruktiv gulsott øker ALP-aktiviteten i blodet med 10 ganger i forhold til normen. Definisjonen av denne indikatoren brukes til laboratoriebekreftelse av denne spesielle gulsottformen. I mindre grad forekommer en økning i ALP-aktivitet i hepatitt, kolangitt, ulcerøs kolitt, tarmbakterielle infeksjoner og tyrotoksikose.

Betydningen av alkalisk fosfatase i bein sykdommer og i traumatologi
ALP er et markørenzym for osteosyntese, det vil si at aktiviteten øker i bein sykdommer eller metastaser av svulster til beinet, samt i helbredelse av brudd.

Årsaker til økt alkalisk fosfatase

Årsaker til lave alkaliske fosfatase nivåer

Hvordan bli testet for alkalisk fosfatase?

For å bestemme ALP-aktivitet tas blod fra en blodåre om morgenen på tom mage. Ingen spesielle diett er nødvendig. Det er nødvendig å være oppmerksom på at noen medisiner kan redusere eller øke aktiviteten til alkalisk fosfatase, så du må konsultere en lege om det er verdt å stoppe disse stoffene i en kort periode. I moderne laboratorier blir enzymaktivitet vurdert av hastigheten av den enzymatiske reaksjonen. Denne metoden har høy spesifisitet, enkelhet, pålitelighet og krever ikke mye tid til analyse..

Så vi undersøkte hovedenzymer, hvis aktivitet bestemmes i en biokjemisk blodprøve. Det skal huskes at diagnosen ikke bare kan baseres på laboratoriedata, det er nødvendig å ta hensyn til historie, klinikk og data fra andre undersøkelser. Derfor bør de gitte dataene brukes til konsultasjon, men hvis det oppdages avvik fra normen, bør du oppsøke lege.

Amylasebestemmelse i biologisk væske diagnostisk verdi

Alpha-amylase (diastase) er et enzym som hydrolytisk klyver polysakkarider til dekstriner, maltose og glukose. Sluttproduktene av amylasens virkning gir ikke en farreaksjon med jod. Bukspyttkjertelen og spyttkjertlene er rikest på amylase. Amylase utskilles hovedsakelig fra disse organene i blodet.

Humant blodplasma inneholder hovedsakelig amylase av to typer: bukspyttkjertel og spytt, den tredje typen amylase er stor eller makroamylase. Hovedsakelig amylase i bukspyttkjertelen skilles ut i urinen, noe som er en av grunnene til at bestemmelsen av amylase i urinen er mer informativ enn i blodet for å vurdere bukspyttkjertelen. Det antas at 65% av amylaseaktiviteten i urinen skyldes pankreasamylase, mens 60% av amylolytisk aktivitet i serum skyldes amylasen i spyttkjertlene. Ved akutt pankreatitt øker pankreasamylase i serum opp til 89%, og i urin opptil 92% uten å endre amylaseverdiene til spyttkjertlene..

Amylaseaktivitet i blod og urin gjennomgår betydelige endringer i løpet av dagen, og individuelle forskjeller blir notert. Svingninger i amylaseaktivitet krever studiet i daglig urin for å vurdere bukspyttkjertelfunksjonen.

Eksisterende metoder for å bestemme aktiviteten til α-amylase er delt inn i 2 grupper:

1. Endepunktsmetode - basert på bestemmelse av resten av ufordøyd stivelse etter intensitetsgraden av reaksjonen med jod (Karavei-metoden).

2. Kinetisk metode.

Normale verdier:

serum α-amylase - 16-30 g / t * l

α-amylase av urin - 28-160 g / t * l

1. Blodserum skal ikke hemolyseres.

2. Forholdene for eksperimentet er av stor betydning, spesielt den nøyaktige inkubasjonstiden er 5 minutter, derfor anbefales det ikke å gjennomføre en samtidig studie av mer enn 5 sera.

3. Bestemmelse av aktiviteten til α-amylase i urinen utføres på samme måte som i blod, men i tilfelle hyperramylazuria anbefales det å fortynne urinen med påfølgende omberegning.

4. Aktiviteten til α-amylase påvirkes av medisiner - antibiotika, smertestillende midler og alkohol.

Klinisk og diagnostisk verdi.

En økning i amylaseaktivitet finnes hovedsakelig i sykdommer i bukspyttkjertelen.

Ved akutt pankreatitt øker aktiviteten til enzymet i blod og urin mer enn 10 ganger. Hyperamilasemia oppstår umiddelbart etter sykdomsutbruddet, når maksimalt 12-24 timer, hvoretter enzymaktiviteten raskt avtar og går tilbake til normalt på dag 2-6. Vanligvis varer hypramylazuria lenger enn økningen i serumenzymaktivitet, derfor er det mer informativt å bestemme α-amylaseaktiviteten i urinen 2-3 dager etter et smertefullt angrep..

Ved kronisk pankreatitt, kreft i bukspyttkjertelen, er ikke økningen i enzymaktivitet så signifikant. I tillegg kan det være en liten økning i aktiviteten til enzymet i sykdommer ledsaget av et lignende klinisk bilde med akutt pankreatitt: akutt blindtarmbetennelse, peritonitt, perforert magesår, etc..

Følgelig gjør uttalt amylasemi det mulig å skille akutt pankreatitt fra kroniske sykdommer i bukspyttkjertelen, så vel som fra andre akutte sykdommer i bukhulen..

Nesten alltid er amylasemi ledsaget av amylazuria. Men bestemmelsen av urinamylaseaktivitet er en mindre nøyaktig indikator på diagnose, fordi frigjøring av amylase i urinen er assosiert med nyrefunksjon. En liten økning i amylase i blodet med en reduksjon i nivået i urinen kan forklares med nedsatt nyrefunksjon..

En reduksjon i amylaseaktivitet er observert med nekrose i bukspyttkjertelen, leversykdommer (hepatitt, skrumplever), omfattende forbrenninger, diabetes mellitus, kakeksi, etc..

Klinisk og diagnostisk verdi av å bestemme aktiviteten til alfa-amylase

I blod og urin

Alfa-amylaseaktiviteten til blod og urin i løpet av dagen (så vel som fra en dag til den neste) varierer betydelig. I tillegg ble signifikante individuelle forskjeller i disse indikatorene notert hos personer uten patologi i fordøyelsessystemet. Med tanke på svingninger i utskillelsen av alfa-amylase i urinen, anbefales det å undersøke aktiviteten til enzymet i urinen som samles opp i løpet av dagen.

En endring i aktiviteten av alfa-amylase i blod og urin oppstår under graviditet. Hyperamilasemia. Aktiviteten til alfa-amylase øker betydelig i sykdommer i bukspyttkjertelen. Ved akutt pankreatitt øker aktiviteten til enzymet i blod og urin 10-40 ganger. Hyperamilasemia oppstår ved sykdomsutbruddet, når maksimalt 12-24 timer etter utvikling, deretter avtar det raskt og går tilbake til normalt på dag 2-6.

Enzymaktiviteten kan økes i en rekke sykdommer som har et lignende klinisk bilde med akutt pankreatitt, nemlig: akutt blindtarmbetennelse, peritonitt, perforert magesår og duodenalsår. Hos pasienter med peritonitt er en økning i amylaseaktivitet en konsekvens av utviklingen av bakterier som danner amylase. Vanligvis øker aktiviteten til enzymet i disse patologiske forholdene 3-5 ganger.

Sykdommer som forårsaker relativt liten hyperamilasemi av ikke-bukspyttkjertelopprinnelse (dvs. uten direkte skade på selve bukspyttkjertelen) inkluderer kolecystitt, kolelithiasis, en tilstand assosiert med galleblærenes brudd, nyresykdom, nyresvikt, kreftmetastase i lungene, skade på spyttkjertlene med hindring av kanalene (et tydelig klinisk bilde av kusma gjør det enkelt å forklare hyperamilasemi), prostatitt, traumatisk hjerneskade, traumatisk sjokk, brannskader, lungebetennelse, diabetisk ketoacidose, graviditetsavbrudd, postoperativ periode.

Aktiviteten av alfa-amylase i blodserum øker også med perforering av spiserøret, magesår, gastritt, akutt tarmobstruksjon, iskemi og infarkt i tynntarmen, peritonitt, brudd på røret under ektopisk graviditet, salpingitt, aortaaneurisme.

Hovedårsakene til hyperamilasemi er: nedsatt utstrømning av sekreter fra kjertlene (produsenter av alfa-amylase), økt permeabilitet av den histohematologiske barrieren i kjertlene, vevsnekrose, nedsatt utskillelse av enzymet gjennom nyrefilteret.

Hyperamylasemi er forårsaket av noen andre hormoner og mange farmakologiske medikamenter, hovedsakelig medisiner som reduserer lukkemuskelen til Oddi: adrenalin, histamin, sekretin, furosemid, salicylater, antikoagulantia, morfin, pantopon, opium, kodein, tetracyklin, samt alkohol.

Til tross for at hyperamilasemi nesten hele tiden ledsages av hyperamylazuria, kan bestemmelsen av alfa-amylaseaktivitet i urinen ikke alltid tjene som en nøyaktig indikator på diagnosen, siden frigjøring av amylase i urinen er assosiert med nyrefunksjon. I tillegg skiller nyrene bare 24% av amylasen ut fra fordøyelseskjertlene fra blodet..

Studien av alfa-amylaseaktivitet i daglig urin er en mer pålitelig biokjemisk test for påvisning av bukspyttkjertelsykdom enn en studie basert på å analysere en enkelt del av den. Etter at aktiviteten av alfa-amylase i blodet etter et angrep av pankreatitt blir normal, kan den forbli forhøyet i urinen i opptil 7 dager.

Koeffisienten "blod-alfa-amylaseaktivitet / urin-alfa-amylaseaktivitet" er en indikator på den funksjonelle nytteverdien til nyrefilteret.

Hypoamylazem er sjelden i klinisk praksis. Det observeres hos pasienter med leversykdommer (hepatitt, skrumplever), ondartede svulster (spesielt i nærvær av levermetastaser), omfattende forbrenninger, hud, diabetes mellitus, hypotyreose, generell ernæringslidelse, vekttap, kakeksi, og også under påvirkning av rus ( for eksempel med toksisose av gravide kvinner). En reduksjon i aktiviteten til alfa-amylase indikerer oftest en svikt i den eksokrine funksjonen i subgastrisk kjertel. Innføringen av sitrater og oksalater i kroppen fører til en reduksjon i aktiviteten til enzymet.

Bestemmelse av total aktivitet av laktatdehydrogenase

Laktatdehydrogenase (L-laktat; NAD-oksidoreduktase, EC 1.1.1.27) er et glykolytisk (cytosolisk sinkholdig) enzym (molekylvekt 135.000 D) som reversibelt katalyserer oksidasjonen av L-laktat til pyruvinsyre. En uunnværlig deltaker i denne reaksjonen er oksidert nikotinadenindinukleotid, som brukes som en kofaktor for et enzym som spiller rollen som en hydrogenakseptor.

Reaksjonen katalysert av laktatdehydrogenase kan fremstilles som følger:

SNzSNONSOO "+ OVER+ Laktatdehydrogenase СНзСОО '+ NAD • Н + Н+

Enzymet er vidt distribuert i menneskekroppen. I henhold til graden av reduksjon i enzymaktivitet, kan organer og vev ordnes i følgende rekkefølge: nyrer, hjerte, skjelettmuskulatur, bukspyttkjertel, milt, lever, lunger, blodserum. Sistnevnte inneholder flere forskjellige proteiner (isoenzymer) som har de katalytiske egenskapene til dette enzymet. Endringer i strukturen til proteindelen av isozymer bestemmer deres forskjellige fysisk-kjemiske egenskaper (spesielt ulik elektroforetisk mobilitet i agar, stivelse, polyakrylamid og andre geler).

I blodplasmaet (serum) finnes fem isoenzymer av laktatdehydrogenase - LDH1, LDH2, LDGz, LDG4, LDH5 - i gelen i avtagende rekkefølge av deres elektroforetiske mobilitet.

Hver av isoenzymer er en tetramer dannet av H- og M.-underenhetene. Det ble funnet at LDH1-fraksjonen hovedsakelig stammer fra hjertevevet, og LDH5-fraksjonen kommer fra leveren. LDH i cytoplasmaet i celler og blodserum er representert med 5 isoenzymer.

Underenhet M finnes hovedsakelig i vev med anaerob metabolisme, mens underenhet H er tilstede i vev med overvekt av aerobe prosesser. Ved elektroforese-metoden på bærere er det mulig å skille alle 5 isoenzymer av LDH, som er representert i blodserumet til friske mennesker i følgende prosentandel: LDH; (14-26%), LDH ^ (29-39%), LDHz (20-26%), LDH4 (8-16%), LDHz (6-16%) - VN Titov et al. (1988).

Laktatdehydrogenase finnes ikke bare i plasma, men også i betydelige mengder i erytrocytter, derfor må serumet som brukes til analyse være friskt, uten spor av hemolyse.

Metoder for å bestemme den totale aktiviteten til LDH er delt inn i to hovedgrupper: 1) kinetisk, basert på den optiske Warburg-testen (den optiske effekten assosiert med omdannelsen av NAD til NAD • H, og omvendt) og 2) metoder der mengden av det dannede produktet bestemmes eller forbrukt substrat etter en fast inkubasjonsperiode (sluttpunktsmetoder).

Arbeid nr. 32 Kolorimetrisk dinitrofenylhydrazin-metode for å bestemme aktiviteten til laktatdehydrogenase i blodserum (ifølge Sevel og Tovarek)

Prinsippet for metoden. L-laktat i et alkalisk medium i nærvær av serum LDH og tilsatt NAD oksyderes til pyruvat. Etter graden av dannelse blir enzymets aktivitet bedømt..

Reagenser

1. 0,45 mol / l natriummelkesyreoppløsning. I en målekolbe med en kapasitet på 100 ml tilsettes 5 ml melkesyre med en konsentrasjon på 800 g / l og 10 ml melkesyre med en konsentrasjon på 400 g / l, og den nøytraliseres med 2 n natriumhydroksidoppløsning til en litt alkalisk reaksjon med pH 7,5 (ved bruk av fenolftalein, svak rosa fargestoffer). Ta volumet til merket med destillert vann.

2. 0,03 mol / l natriumpyrofosfatoppløsning, pH 8,8. 6,69 g Na ble tilsatt til en 500 ml målekolbe2 R2Ofem • N2Å, 50 ml dietter i vann, blandingen blandes grundig og pH i løsningen justeres til 8,8 ved bruk av 1 N HC1-løsning. Volumet på kolbeinnholdet føres til merket med destillert vann. Reagenset er stabilt i en måned når det oppbevares i kjøleskap.

3. NAD-løsning. 3 mg NAD (kjemisk ren) oppløses i 1 ml destillert vann (med en hastighet på 0,6 mg per prøve). Reagenset er stabilt i 4 uker når det oppbevares i kjøleskap.

4. En løsning av 2,4-dinitrofenylhydrazin. 19,8 mg 2,4-dinitrofenylhydrazin oppløses i et lite volum 1N saltsyreoppløsning mens blandingen varmes opp i et vannbad. Etter avkjøling justeres volumet til 100 ml med 1 N saltsyreoppløsning. Neste dag filtreres reagenset. Løsningen lagres i en mørk glassbeholder, den kan brukes i ett år.

5,4 N natriumhydroksydoppløsning.

6.1N saltsyreoppløsning.

7. Standardoppløsning av natriumpyruvinsyre. 11 mg krystallinsk natriumpyruvsyre oppløses i en liten mengde destillert vann, overføres til en 100 ml målekolbe, og oppløsningsvolumet tilsettes merket med destillert vann. 1 ml av oppløsningen inneholder 110 μg natriumpyruvat, noe som tilsvarer 88 μg pyruvinsyre. Arbeidsstandardløsningen fremstilles ved å fortynne den grunnleggende løsningen 10 ganger med destillert vann. I 1 ml arbeidsoppløsning 8,8 μg pyruvinsyre.

Bestemmelsesfremdrift. 0,1 ml serum fortynnet 1: 2 blandes med 0,3 ml NAD-løsning og oppvarmes i 5 minutter ved 37 ° C. Tilsett deretter 0,8 ml pyrogenfosfatoppløsning og 0,2 ml natriummelkesyreoppløsning, forvarmet ved 37 ° C. Blandingen inkuberes ved 37 ° C i 15 minutter etter inkubering, 0,5 ml av en løsning av 2,4-dinitrofenylhydrazin tilsettes prøven og holdes i 20 minutter ved romtemperatur. Tilsett deretter 5 ml natriumhydroksydoppløsning, bland innholdet i røret og etter 10 minutter

måle absorpsjonen i bølgelengdeområdet 500-560 nm, for eksempel på en FEC med et grønt filter i en kyvette med en lagtykkelse på 10 mm. Indikatorene for den optiske tettheten til testprøven registreres under hensyntagen til absorpsjonen av kontrollen.

Kontrollprøven settes på samme måte som den eksperimentelle, men serum fortynnet 1: 2 tilsettes etter inkubering av blandingen. Enzymaktiviteten beregnes i henhold til kalibreringsgrafen. Aktiviteten til laktatdehydrogenase uttrykkes i mmol pyruvinsyre dannet ved inkubering av 1 liter serum i 1 time ved 37 ° C.

For å få data for å bygge en kalibreringsgraf, må du gjøre følgende. Forbered et antall fortynninger fra arbeidsstandardløsningen av natriumpyruvinsyre (tabell 2). Hell deretter 0,5 ml 2,4-dinitrofenylhydrazinoppløsning i reagensglassene. Deretter behandler du standardprøver på samme måte som eksperimentelle..

Når du setter en kontrollprøve, tilsettes 0,6 ml destillert vann, 0,8 ml pyrofosfatoppløsning og 0,5 ml 2,4-dinitrofenylhydrazinoppløsning i prøverøret. Deretter blir prøven behandlet på samme måte som eksperimentet.

For å finne indikatorene for laktatdehydrogenaseaktivitet i dimensjonen "mmol pyruvinsyre per 1 liter serum i 1 times inkubasjon ved 37 ° C" multipliseres mengden μmol pyruvinsyre i standardprøven med en faktor på 120 eller mengden μg pyruvinsyre - med 1,41.

For å uttrykke enzymets aktivitet i enheter med en ny dimensjon, kan du bruke en annen formel:

Laktatdehydrogenaseaktivitet i mmol / (h • l) = С • 120: 88,

hvor C er mengden μg pyruvinsyre i prøven, 120 er konverteringsfaktoren for μg pyruvinsyre i mg, 88 er konverteringsfaktoren til indikatorene fra "mg" til mmol.

Når man konstruerer en kalibreringsgraf på abscisseaksen, blir verdiene til enzymaktiviteten plottet, uttrykt i dimensjoner, mmolDh • L) og presentert i den siste kolonnen i tabell 33. Det rette forholdet mellom konsentrasjonen av pyruvinsyre og optisk tetthet forblir fra 0 til 10 mmol / (h • L).

Data for å bygge en kalibreringsgraf

Arbeidsstandardløsning av pyruvat, mlNatriumpyrofosforsyreoppløsning, mlDestillert vann, mlInnhold av pyruvinsyre i en standardprøveLDH-aktivitet: mmol pyruvinsyre per 1 liter serum i 1 times inkubasjon
mcgμmol
0,10,80,50,880,011,2
0,20,80,41,760,022.4
0,40,80,23.520,044.8
0,60,8-5.280,067.2
0,80,6-7.040,089.6

Normale verdier av total LDH-aktivitet i blodserum - fra 0 8 til

Merknader.

1. Blodserum skal ikke hemolyseres.

2. For forskning er det bedre å bruke friskt serum.

3. Det anbefales ikke å bruke oksaloeddikplasma, siden oksalsyresalter hemmer enzymet.

Ved hjelp av denne metoden er det mulig å studere og urea-stabil brøkdel av LDH.

Prinsippet for metoden er basert på egenskapen til urea for å hemme aktiviteten til LDHer med nesten 100%. Med den parallelle bestemmelsen av aktiviteten av total LDH, beregnes prosentandelen av innholdet av fraksjonen som er stabil for urea.

Reagenser. Det samme som i forrige metode. I tillegg brukes en ureaoppløsning, tilberedt for 0,03 mol / l natriumpyrofosforsyreoppløsning (14,4 g urea tilsettes til 100 ml natriumpyrofosfatløsning, pH 8,8).

Prosessen med å bestemme aktiviteten til den totale og urea-stabile fraksjonen av LDH preges av følgende funksjoner:

1. I metoden for å studere aktiviteten til den urea-stabile fraksjonen av LDH, brukes en løsning av natriumpyrofosfatholdig urea

2. Når du utfører det første trinnet av metoden, blandes 0,1 ml serum fortynnet 1: 2 grundig med 0,08 ml natriumpyrofosfatoppløsning som inneholder urea, og med 0,3 ml NAD-løsning. Forinkubasjon utføres i 1 time ved + 25 ° C, og lukkes røret med et lokk. Deretter tilsettes 0,2 ml melkesyreoppløsning til reagensrøret og inkuber blandingen i 15 minutter ved + 37 ° C.

(3) I fremgangsmåten for å bestemme den totale aktiviteten til LDH, utelukk trinnet for tilberedning av løsningen ved en temperatur på 37 ° C, og etter drenering av reagensene ved romtemperatur, fortsett straks til inkubering av blandingen i 15 minutter ved en temperatur på 37 ° C..

Resten av metoden skiller seg ikke fra den som er beskrevet ovenfor. Beregningen reduseres til å fastsette prosentandelen av ureastabil LDH i forhold til totalen.

I norm er urea stabil LDH av sammensetning 25-36% av total LDH.

Laboratoriediagnostikk og metoder for å studere funksjonen i bukspyttkjertelen

Følgende metoder brukes til å diagnostisere bukspyttkjertelsykdommer:
• studie av aktiviteten til bukspyttkjertelenzymer i blod, urin;
• sonde og sannsynlige metoder for å studere den eksokrine funksjonen i bukspyttkjertelen;
• vurdering av den endokrine funksjonen i bukspyttkjertelen (bestemmelse av innholdet av C-peptid i blodet, Staub-Traugott-test, etc.);
• vurdering av trofisk insuffisiens.

I tillegg brukes immunologiske, genetiske, cytologiske, histologiske studier, bestemmelse av nivået av bukspyttkjertelpolypeptid, CA 19-9 svulstmarkører, karcinoembryonisk antigen, etc. for laboratoriediagnose av bukspyttkjertelsykdommer..

Studie av aktiviteten til enzymer i bukspyttkjertelen i blod og urin

Den første delen av diagnostiske tester brukes vanligvis til å oppdage fenomenet frigjøring (unndragelse) av enzymer i blodet, som oppstår når organparenkymet ødelegges og det intraduktale trykket øker..

Enzymer kommer inn i interstitiell væske, lymfe og blod, og senere i urinen. Bukspyttkjertelenzymer kommer også inn i blodet fra sekretoriene og bukspyttkjertelkanalene. I tillegg absorberes enzymer i den proksimale tynntarmen..

Bestemmelse av amylase og dens isoenzymer

Blodplasma inneholder a-amylase av to isoenzymtyper, produsert av bukspyttkjertelen og spyttkjertlene (hovedsakelig parotid):
• bukspyttkjertel (p-type);
• spytt (s-type).

I tillegg har det blitt funnet amylolytisk aktivitet i mange vev: tynntarmen, leveren, nyrene, musklene, lungene, egglederne og fettvevet. Dette betyr imidlertid ikke at de alle syntetiserer og transporterer en betydelig mengde amylase inn i blodet. Andelen amylolytisk aktivitet av pankreas a-amylase er 30-50%. P- og s-amylaser er forskjellige i deres fysisk-kjemiske egenskaper, har forskjellige nyrekurenser og halveringstider i kroppen (s-amylase - 18 timer, p-amylase - 124 timer).

Amylase i blodet er i fri (oppløst) tilstand og bundet til plasmaproteiner og dannede elementer.

Så bestemmelse av amylaseaktivitet i blod og urin er en av de første og vanligste biokjemiske metodene for diagnostisering av pankreatitt. Siden 1908, da Wohlgemut utviklet en metode for å bestemme aktiviteten til amylase i biologiske væsker, er mer enn to hundre metodiske metoder for å gjennomføre denne analysen blitt foreslått..

Amylase-isozymer måles i mange rutinelaboratorier. De bestemmes i serum, urin eller andre biologiske væsker ved kromatografi, elektroforese eller isoelektrisk fokusering. Modifisering av amylasetesten - bestemmelse av amylase-kreatininclearance ratio, men denne testen krever urinoppsamling i 24 timer. Resultatet uttrykkes som en prosentandel av clearance ratio: Clearance ratio = (urinamylase aktivitet / serum amylase aktivitet) X (serum kreatinin / urin kreatinin) X 100

Med OP økes klareringsforholdet, noe som kan forklares med en økning i aktiviteten til bukspyttkjertelisoenzymet, som har en høyere clearance (sammenlignet med isoenzymet s-thiiia), og en reduksjon i tubulær reabsorpsjon av proteiner. På grunn av variasjonen i endringer i nyrefunksjonen i OP, gir verdien av å bestemme forholdet mellom amylase og kreatininclearance alvorlig tvil, og denne metoden har ikke vært mye brukt i praksis..

Det er motstridende informasjon om stabiliteten til a-amylase: sammen med påstanden om at enzymaktiviteten er stabil ved romtemperatur i en uke, er det tegn på en reduksjon i aktiviteten etter noen timer. Dette kan forklare den lave følsomheten til metoden. Den lave følsomheten ved å bestemme aktiviteten til amylase i blodet og urinen er også forbundet med den korte varigheten av hyperamylasemi og hyperamylazuria i pankreatitt. Dermed begynner aktiviteten av amylase i blodet å øke etter 2-12 timer fra begynnelsen av forverring av sykdommen, når maksimum etter 20-30 timer, og normaliseres etter 2-4 dager med et gunstig sykdomsforløp..

Aktiviteten til amylase i urinen begynner å øke i løpet av 4-10 timer fra sykdomsutbruddet, og etter 8-10 timer kan det allerede normalisere seg, men som regel vedvarer det i 3 dager etter økningen.

Under en forverring av CP kan amylaseaktiviteten i blod og urin forbli innenfor normale verdier, siden økningen i enzymaktivitet hos slike pasienter skjer mot bakgrunnen av et opprinnelig lavt nivå assosiert med fibrose i bukspyttkjertelen. Ved alvorlig, progressiv løpet av OP eller med forverring av CP, kan amylaseaktivitet "tømme" til normale og subnormale verdier. Hos 20% av pasientene med OP er serumamylaseaktivitet normal. Dermed er det umulig å bestemme alvorlighetsgraden av den nåværende forverringen av pankreatitt og den umiddelbare prognosen av serumamylaseaktiviteten..

I følge litteraturen er bestemmelsen av amylaseaktivitet i urinen mer informativ enn i blod, siden hyperamylazuria er mer stabil enn hyperamylazuria. Tilgjengeligheten av urinsamling gjør at studien kan gjentas mange ganger, og derfor oppdage til og med en liten økning i indikatoren. I tillegg, på grunn av forskjeller i nyreutskillelse, er aktiviteten av bukspyttkjertelisoamylase i urinen betydelig høyere enn i blodet..

Forverring av XII ledsages av spesifikk skade på den proksimale delen av nefronrøret, noe som fører til en reduksjon i reabsorpsjon og en økning i nyreclearance, dvs. hyperamylazuria er et resultat av hyperamilasemia og undertrykkelse av tubular reabsorpsjon. Som allerede nevnt er dette grunnlaget for bestemmelsen av forholdet mellom amylase og kreatininclearance. Mer følsom enn den amylazuriske testen er beregningen av strømningshastigheten til uroamylase når urin samlet med visse intervaller (før og etter matbelastning) undersøkes. Følsomheten til disse prisene i CP er 49-73%.

For å øke sensitiviteten til studien av amylaseaktivitet i blod og urin, er det nødvendig å utføre den på første dag på sykehusinnleggelse av pasienter med CP, minst to ganger etter instrumentelle studier, samt på tidspunktet for intensivering av magesmertsyndrom. Samtidig øker sensitiviteten til testen fra 40 til 75-85%.

Tolkning av resultatene for å bestemme aktiviteten til amylase i blod og urin er også komplisert av det faktum at enzymet er inneholdt i spyttkjertlene, tykktarmen, skjelettmuskulaturen, nyrene, lungene, eggstokkene, egglederne, og derfor er det mulig å bestemme amylolytisk aktivitet i melk, spytt, tårevæske og svette.... Dermed er det mulig å øke nivået i biologiske væsker på grunn av ikke-bukspyttkjertelårsaker (tabell 2-8): med sårperforering, tarmobstruksjon, peritonitt, mesenterisk trombose, kolecystitt, kolangitt, parotitt, nyresvikt, ektopisk graviditet, akutt blindtarmbetennelse, kreft lunger, diabetisk acidose, feokromocytom; etter operasjoner for hjertefeil, leverreseksjon; når du bruker opiummedisiner, sulfonamider, tiaziddiuretika, p-piller.

Tabell 2-8. Årsaker til hyperamilasemi

For å øke spesifisiteten til hyperamilasemi ble det foreslått å vurdere en økning i enzymaktiviteten 3-6 ganger som diagnostisk signifikant. Imidlertid eksisterer ikke enzymaktiviteten patognomonisk for pankreatitt i blodet. På grunn av den betydelige reserven av enzymet i de acinære celler, fører enhver brudd på deres integritet eller den minste hindring av utstrømningen av pankreasekresjon til en betydelig frigjøring av amylase i blodet, selv med et mildt forløp av pankreatitt..

For å øke spesifisiteten til studien av enzymaktiviteten i blodet, er det ikke nødvendig å bestemme dets totale innhold, men pankreasfraksjonen. Hos friske mennesker utgjør p-amylase 40% av total serumamylase, de resterende 60% er representert av spyttisoenzymet. I pankreatitt endres dette forholdet: aktiviteten til pankreasisoamylase er 75-80% av aktiviteten av total blodamylase. Bestemmelse av β-amylaseaktivitet er spesielt viktig hos pasienter med CP og normal total amylaseaktivitet.

En økning i indikatoren indikerer en forverring av CP, og en reduksjon indikerer eksokrin bukspyttkjertelinsuffisiens assosiert med atrofi av acinar vev og organfibrose hos pasienter som har gjennomgått en rekke angrep. Spesifisiteten for å bestemme aktiviteten til bukspyttkjertelamylase i CP overstiger ikke 88,6%, følsomheten er 40-96,9%.

Lær Mer Om Diagnostisering Av Pankreatitt

Oppblåsthet etter cottage cheese forårsaker

Problemet med luft i magen er ganske alvorlig. Akkumulering av luft i tarmene forårsaker ubehagelige følelser av utspenning, tyngde og til og med smerte. Mat som forårsaker oppblåsthet og gass, er ofte skylden.